BOKU - Universität für Bodenkultur Wien - Forschungsinformationssystem
Gewählte Diplomarbeit / Masterarbeit:
Daniel Burgstaller
(2015):
Purification of Murine Leukemia Virus-like Particles by Monoliths.
Diplomarbeit / Masterarbeit - Institut für Biotechnologie,
BOKU-Universität für Bodenkultur,
pp 50.
UB BOKU
obvsg
- Abstract:
- Virusähnliche Partikel (engl. Virus-like particles (VLPs)) werden als vielversprechende Alternative zu Lebendimpfstoffen gesehen, da sie immunologisch relevante Strukturen aufweisen, welche humorale und zellulare Immunantworten auslösen. Es fehlt ihnen jedoch an den nötigen regulatorischen Mechanismen und an Erbgut um eine Zelle zu infizieren. Downstream processing ist der Engpass in biopharmazeutischen Produktionsprozessen. Neue wissenschaftliche Ansätze, strenge Richtlinien der Kontrollbehörden, wirtschaftliche Aspekte sowie sich ändernde Nachfrage verlangen nach effektiven und sicheren Aufreinigungsverfahren. Eine vielversprechende Technologie bietet die Aufreinigung von VLPs mit Monolithen: kontinuierliche, homologe Chromatographiesäulen, gegossen in einem Block mit vernetzten Kanälen in der Größe von bis zu sechs µm. Konvektiver Transport in diesen Kanälen ermöglichet schnellen Stoffaustausch, was zu Vorteilen bei der Aufreinigung pharmazeutisch relevanter großer Biomoleküle wie etwa Plasmid DNA oder Virus hinsichtlich Produktivität führt. Es wurde eine monolithenbasierende, chromatographische Methode entwickelt, die es ermöglicht, murine leukämievirenähnliche Partikel (engl. Murine leukemia virus (MLV) VLPs) aus filtriertem Kulturüberstand zu gewinnen. Per Stufenelution konnte ein Ertrag von 35% an VLPs, eine Zellproteinabreicherung von 90% und einer DNA-Abreicherung von 99% erreicht werden. Dieser schnelle, sichere und maßstabsübertragbare Prozess erlaubt, es innerhalb von fünf Stunden über 2500 Impfdosen an VLPs direkt aus filtriertem Kulturüberstand mit einem 1 mL Monolithen zu gewinnen.
- Beurteilende(r): Jungbauer Alois
- 1.Mitwirkender: Steppert Petra