Neurale Kohlenhydratepitope in wirbelosen Tieren.

Schon seit geraumer Zeit erscheinen Berichte, daß IgG oder auch IgE Antikörper gegen pflanzliche Glykoproteine mit Glykoproteinen von Insekten kreuzreagieren. So sind insbesondere Antikörper gegen Kren-Peroxidase zu einem bewährten Mittel zur Markierung von Neuronen in Drosophila und in Heuschrecken geworden. Vor kurzem wurde auch gezeigt, daß bestimmte Nervenzellen von Caenorhabditis elegans damit gefärbt werden können. Die strukturelle Grundlage dieser Kreuzreaktion wurde allerdings in keinem dieser Fälle aufgeklärt. Es gibt allerdings Hinweise darauf, daß die jener Anteil des Anti-Peroxidase Serums dafür verantwortlich ist, der gegen Kohlenhydrat-Epitope gerichtet ist. Um die Ursache dieser spezifischen Neuronen-Anfärbung zu ergründen, wollen wir die Struktur und die Biosynthese der Asn-gebundenen Oligosaccharide in Drosophila und Caenorhabditis bestimmen. Besonderes Augenmerk wird dabei auf potentielle kreuzreagierende Determinanten, wie z.B. die 'core'-a1,3-gebundene Fukose gerichtet. Diese Modifikation wurde bis dato in Pflanzen, Insekten und Helminthen gefunden. Mittels Immunaffinitätschromatographie sollen kreuzreaktive Glykoproteine isoliert und mittels MALDI und HPLC deren Glykane und Peptidmuster analysiert werden. Darüber hinaus werden versuchen, das Gen für 'core'- a1,3-Fukosyltransferase in Drosophila zu finden, zu klonieren und rekombinant zu exprimieren. Wir werden die Aktivität dieses Enzyms in Extrakten von Drosophila und Caenorhabditis bestimmen. Die immunologische Kreuzreaktion von Drosophila und Caenorhabditis Proteinen mit Anti-Peroxidase Serum soll durch Inhibition mit Neo-Glykokonjugate, die mithilfe der rekombinanten 'core'- a 1,3-Fukosyltransferase synthetisiert wurden, untersucht werden.