Katalytischer Mechanismus der UDP-GlcNAc:Mannosid N-Acetylglucosaminyltransferasen I und II
Abstract
Die kovalente Modifikation von Proteinen mit Zuckerseitenketten an ausgewählten Asparagin- Resten wird als N-Glykosylierung bezeichnet. Die Ausbildung dieser N-Glykane ist oft von entscheidender Bedeutung für die korrekte Synthese und Funktion des jeweiligen Glykoproteins. Der Großteil der in Säugetierglykoproteinen nachweisbaren N-glykosidisch gebundenen Oligosaccharide gehört entweder der Klasse der oligomannosidischen oder komplexen N-Glykane an. Die Schlüsselenzyme in der Umwandlung von oligomannosidischen in komplexe Strukturen sind die N-Acetylglucosaminyl-Transferasen I (GnT-I) und II (GnT-II). Trotz der physiologischen Bedeutung von GnT-I und GnT-II ist der katalytische Mechanismus dieser Enzyme noch nicht aufgeklärt. Dieses Projekt hat eine detaillierte Charakterisierung der Funktionsweise von GnT-I und GnT-II auf molekularer Ebene zum Ziel. Der von uns gewählte methodische Zugang beruht auf gerichteter Mutagenese kürzlich klonierter GnT-I und GnT-II DNAs. Wir werden Aminosäuren, welche von Pflanzen bis zum Menschen strikt konserviert sind, gezielt verändern. Diese mutierten cDNAs sollen anschließend in einem heterologen System exprimiert werden. Schlußendlich gilt es die katalytischen Eigenschaften der korrespondierenden Proteine bona fide zu charakterisieren. Dieses Projekt wird unser derzeitiges Verständnis der Aktionmechanismen von Glykosyltransferasen wesentlich verbessern. Außerdem handelt es sich dabei um einen ersten Schritt zur gezielten Entwicklung von neuartigen Inhibitoren, welche zur Modulation der N-Glykosylierung in eukaryotischen Zellen in vivo verwendet werden können.
Schlagworte Glykosyltransferase Glykobiologie Enzymmechanismus Proteinengineering rekombinante Glykoproteine
Publikationen
Structural and functional features of glycosyltransferases.
Autoren: Breton, C; Mucha, J; Jeanneau, C Jahr: 2001
Originalbeitrag in Fachzeitschrift
Structure-function analysis of rabbit UDP-GlcNAc-N-acetylglucosaminyltransferase I.
Autoren: Mucha, J., Scanziani, M., Svoboda, B., Zoihsl, O., Hartmann, B., Schachter, H., Rini, J., Glössl, J., Mach, L. Jahr: 2001
PUBLIZIERTER Beitrag für wissenschaftliche Veranstaltung
Biosynthesis of glycoprotein N-glycans in plants
Autoren: Glössl, J. Jahr: 2003
PUBLIZIERTER Beitrag für wissenschaftliche Veranstaltung
Two closely related forms of UDP-GlcNAc: alpha6-D-mannoside beta1,2-N-acetylglucosaminyltransferase II occur in the clawed frog Xenopus laevis.
Autoren: Mucha, J; Svoboda, B; Kappel, S; Strasser, R; Bencur, P; Fröhwein, U; Schachter, H; Mach, L; Glössl, J Jahr: 2002
Originalbeitrag in Fachzeitschrift
Mitarbeiter*innen
Josef Glößl
Em.O.Univ.Prof. Dr.phil. Josef Glößl
josef.gloessl@boku.ac.at
Tel: +43 1 47654-94322
Projektleiter*in
01.06.2000 - 31.05.2003
Lukas Mach
Univ.Prof. Dipl.-Ing. Dr.nat.techn. Lukas Mach
lukas.mach@boku.ac.at
Tel: +43 1 47654-94065, 94360
Projektmitarbeiter*in
01.06.2000 - 31.05.2003
BOKU Partner
Externe Partner
Department of Biochemistry, Hospital for Sick Children
keiner
Partner