Authentizitätskontrolle von probiotischen Milchsäurebakterien mittels molekularbiologischer Methoden

In den letzten Jahren werden Milchsäurebakterien (MSB) mit probiotischer Relevanz (zumeist Lactobacillus, Bifidobacterium und Enterococcus) in zunehmendem Maße als Starterkulturen für die Produktion fermentierter Milchprodukte sowie für die Herstellung von pharmazeutischen Präparaten und sogenannten "Nutraceutica" eingesetzt. Die meisten MSB-Spezies besitzen GRAS-Status und gelten generell als sicher, d.h. daß beim Umgang mit diesen Mikroorganismen kein Risiko für den Menschen besteht. Lactobacillus rhamnosus und Enterococcus faecium werden allerdings in "Risikogruppe 2" eingestuft, d.h. daß sie ein potentielles Risiko für den Menschen darstellen. Aus diesem Grund ist die eindeutige und zuverlässige Identifizierung und Klassifizierung von in Lebensmitteln eingesetzten probiotischen Stämmen mittels geeigneter Verfahren als unerläßlich für die Sicherheit des Konsumenten anzusehen, und die Authentizitätskontrolle von MSB bleibt eine Herausforderung für die Untersuchungsstellen. L. rhamnosus- und E. faecium-Stämme (Typ- und Referenzstämme, kommerziell erhältliche Stämme mit probiotischer Funktionalität) wurden mittels Protein- und DNA-Fingerprint-Techniken hinsichtlich ihrer genetischen Stabilität und Identität untersucht. Die PCR (Polymerase chain reaction) unter Verwendung spezies-spezifischer Primerpaare kann mit gutem Erfolg zum Nachweis bzw. zur Identifizierung von Spezies eingesetzt werden. Genomisches DNA-Fingerprinting mittels RAPD-PCR (Randomly amplified polymorphic DNA-PCR) erwies sich als rasch durchführbares, kostengünstiges und hochauflösendes Verfahren, das zur Differenzierung einzelner Stämme einer Species bestens geeignet ist. Die mittels PFGE (Pulsfeld-Gelektrophorese) erhaltenen DNA-Restriktionsmuster erwiesen sich als stammspezifisch. Die hohe diskriminierende Wirkung der PFGE kann somit zur Stamm-Differenzierung bzw. Identitätskontrolle bei MSB verschiedener Herkunft eingesetzt werden.